Выявление антител класса IgG к Borrelia burgdorferi в тест-системе Vitrotest® Borrelia-IgG основано на принципе «непрямого» твердофазного ИФА в двухэтапной инкубации.
○ ТК084 — 96 анализов
- Твердая фаза: стрипированный ИФА-планшет с засорбированной смесью антигенов Borrelia burgdorferi sensu lato.
- Конъюгат: моноклональные антитела к IgG человека, конъюгированные с пероксидазой хрена.
- Хромоген: однокомпонентный ТМБ.
- Объем образца для анализа: 10 мкл.
- Время проведения анализа: 75 минут.
Болезнь Лайма (БЛ) является прогрессирующим заболеванием, включающем несколько клинических синдромов: мигрирующая эритема (МЭ), нейробореллиоз, артрит Лайма, и хронический атрофирующий акродерматит. Наиболее обычным клиническим проявлением ранней локализированной БЛ является МЭ, которая появляется у около 70% пациентов через 3-30 (в среднем 7) дней после укуса. МЭ представляет собой сыпь, появляющуюся в месте укуса клеща, и постепенно расширяющуюся до кольца с центральной чистой зоной. Если инфицирование остается незамеченным и нелеченным на этой ранней локализированной стадии, B. burgdorferi может распространиться в другие ткани и органы. Вторая, так называемая ранняя рассеянная стадия болезни имеет более тяжелые проявления, поражающие кожу, нервную систему, суставы, и сердце. Эта стадия преимущественно характеризуется неврологическими симптомами (нейробореллиоз) либо болями в суставах (артрит Лайма). Третьей стадией является поздняя рассеянная БЛ. Ее типичными проявлениями являются хронический атрофический акродерматит и артрит. По своим проявлениям БЛ подобна таким аутоиммунным расстройствам, как ревматоидный артрит, рассеянный склероз, и системная красная волчанка.
Клещи чаще всего заражаются на личиночной стадии от инфицированных грызунов. Будучи однажды инфицированными, клещи могут передавать инфекцию на протяжении всей собственной жизни.
Не все клещи компетентных видов являются переносчиками инфекции. Измерение уровней преобладания B. burgdorferi среди клещей продемонстрировало такие различные значения, как 19% и 60%. Вероятность быть инфицированным рассматривается как высокая тогда, когда клещ остается прикрепленным к коже более чем на 24 ч.
Наиболее высокий риск инфицирования БЛ возникает у людей, живущих в сельской местности либо посещающих ее, особенно у кемперов и путешественников. Риск инфицирования возникает не только в лесу, но и часто в парках, пользующихся популярностью у населения. Иксодовые клещи являются единственными естественными агентами, через которых может заразиться человек. Данные относительно возможности заражения через других людей отсутствуют.
Известно, что инфекция B.burgdorferi вызывает сильный гуморальный иммунный ответ организма. Титры IgM в типичном случае являются наиболее высокими между 3-й и 6-й неделями после начала болезни, а затем снижаются, однако у многих пациентов IgM сохранялся на высоком уровне и во время более поздних проявлений болезни, отображая ее активность. Титры IgG начинают возрастать через 1-2 недели после начала болезни, но самых высоких уровней титры достигают лишь спустя месяцы, когда уже имеется артрит.
Если пациент выздоравливает, уровни антител в первые недели после выздоровления возрастают, и лишь затем начинают снижаться. Если БЛ достигает запущенной стадии, IgM и особенно IgG определяются годами у большинства пациентов. В противоположность этому, своевременное лечение антибиотиками на локализированной стадии прерывает развитие стабильного иммунного ответа, причиной чего может являться отсутствие IgG и IgM после выздоровления. Следовательно, повторное инфицирование является возможным после успешно вылеченной ранней, но не поздней БЛ.
Геном B. burgdorferi кодирует около 1500 белков, почти половина которых находятся в плазмидах. Из этих белков, иммуногенными являются около 100. Существует значительная серологическая кросс-реактивность между B.burdhoferi и возбудителями человеческих спирохетозов, особенно возвратного тифа и сифилиса.
Лишь несколько белков B.burdhoferi являются испытанными специфическими антигенами и поэтому представляют ценность для серодиагностики. К этим белкам принадлежат FlaB (BB0147), внешний мембранный белок P66 (BB0603), белки OspA и OspB (BBA15 и BBA16), декоринсвязывающий белок B (BBA25), OspC (BBB19), фибронектинсвязывающий белок (BBK32), и VlsE (BBF33). FlaB является частью жгутикового аппарата; остальные белки находятся во внешней мембране.
В данный момент “золотой стандарт” в диагностике БЛ отсутствует. Диагноз БЛ основывается на
а) признаках и симптомах;
б) истории контакта с инфицированными клещами;
в) лабораторной диагностике.
Единственным проявлением, характерным для БЛ, является МЭ, а клинические черты более поздних проявлений не являются уникальными для инфекции B. burgdorferi. К сожалению, МЭ возникает лишь у около 70% пациентов; также у многих пациентов БЛ диагностируется уже на рассеянной стадии. Контакт с клещами может легко остаться незамеченным, поскольку многие люди бывают укушенными так называемыми нимфами (ювенильная стадия клещей), которые значительно меньше по размеру. По этой причине необходимо определять инфекцию B. burgdorferi лабораторными методами, а именно, путем культивирования возбудителя, ПЦР или иммунотестов.
Тестами, доступными для серологического анализа, являются ИФА и ХЛА тесты. Их характеристики лучше на поздних стадиях БЛ. ИФА тесты могут принадлежать к первому, второму, и третьему поколению. ИФА тесты первого поколения используют в качестве антигена цельноклеточные лизаты; ИФА тесты второго поколения — нативные очищенные антигены; ИФА тесты третьего поколения — рекомбинантные или синтетические антигены. Иммуноблотты используются преимущественно как тесты подтверждения. Уровень антител может, кроме сыворотки, определяться и в спинномозговой жидкости.