ua ru

Иммуноферментный анализ в диагностике

Современные методы специфической диагностики

Среди методов специфической лабораторной диагностики инфекций выделяют прямые и косвенные.

К прямым методам относятся:

Среди косвенных (серологических) методов чаще всего используются:

Иммуноферментный анализ (ИФА)

ИФА был разработан в 70-х годах ХХ века на пересечении иммунохимии и инженерной энзимологии и является эволюционным продолжением и альтернативой радиоиммунного анализа в последовательности серологических методов диагностики.

На сегодня ИФА занял прочную позицию в диагностике инфекционной патологии человека, животных и растений, в онкологии и эндокринологии. Основными преимуществами ИФА являются:

Весь процесс иммуноферментного анализа можно условно разделить на три основные стадии:

С точки зрения способа выполнения все методы ИФА можно разделить на две группы:

В качестве твердой фазы в ТИФА используют 96-луночные полистироловые планшеты, способные сорбировать макромолекулы. В каждой лунке планшета проводится анализ отдельного образца.

Основные компоненты в ТИФА

Основными компонентами твердофазного ИФА являются: иммуносорбент - адсорбированные на твердой фазе антигены или антитела (в зависимости от целей анализа), иммуноферментный конъюгат - ковалентно сшитые с ферментом специфические антитела или антигены и исследуемый материал - биологические жидкости организма.

В качестве антигенов могут использоваться очищенные нативные антигены микроорганизмов или их аналоги - рекомбинантные белки и синтетические пептиды.

В качестве антител используют поликлональные (пул специфических антител, выделенных из сывороток животных) или моноклональные (моноспецифические антитела, полученные методами клеточной инженерии) антитела.

Иммуноферментные конъюгаты - это ковалентно сшитые молекулы антигенов или антител с ферментом. Одним из биологических феноменов, на котором базируется ИФА, является высокая каталитическая активность ферментов, используемых в качестве индикатора в ИФА.

Основными ферментными метками являются: